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胎牛血清不同组分对昆虫杆状病毒复制的影响

胎牛血清不同组分对昆虫杆状病毒复制的影响

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目前,在动物疫苗生产中,为了降低生产成本,减少生物制品纯化损失,减少由于不确定蛋白或血清组分带来干扰或差异的风险,提高生物制品的安全性,大多数采用无血清培养基。
 
但在使用过程中,有些病毒,如口蹄疫病毒有时会出现细胞生长良好,但病毒产量不高的问题。为了克服这一问题,许多厂家在病毒生产过程中,还是要加入1%-3%的低浓度血清。
 
如果能把血清中不同组分对病毒复制的影响分析清楚,即哪些组分对病毒复制起促进作用,哪些组分起抑制作用,从而在疫苗生产中加入对病毒复制起促进作用的血清组分,去除那些对病毒复制有抑制作用的组分,则可以有效提高疫苗产量。
 
为此, 蕊特生物通过亲和凝胶层析柱法分离获得血清中四个混合组分(S1、S2、S3和S4),并进行了病毒培养实验,通过培养昆虫杆状病毒,观察上述不同组分对病毒复制效率的影响。
 
 
【一】空斑实验观察病毒复制结果
 
通过空斑测定实验发现,与FBS对比,S1样本浓度在1.3%以上时,空斑数显著增加。S2样本的空斑数没有增加,反而降低。S3样本浓度在2.5%以上时,空斑数显著增加,没有S1显著。S4样本的空斑数变化无显著差异。结果见表1、图1-图5。
 
 
【二】荧光强度观察病毒复制结果
 
通过肉眼观察荧光强度发现,与FBS对比,S1样本随着浓度升高,荧光强度显著增强。S2样本的荧光强度没有增加。S3样本浓度在2.5%以上时,荧光强度显著增强。S4样本的荧光强度没有明显变化。结果见图6-图10。
 
 
【三】流式细胞术检测病毒复制结果
 
通过流式细胞术检测发现,与FBS对比,S1样本浓度在1.3%以上时,病毒数量显著增多。S2样本的病毒数量没有显著增加。S3样本浓度在2.5%以上时,荧光强度显著增多。上述实验证实S4对病毒复制没有明显促进作用,故没有进行流式检测。结果见图11-图13。
【结 论】
 
1、血清样本S1在浓度1.3%以上时,对于BAC的复制有促进作用;
2、S2没有促进效果,反而随着S2的浓度上升而出现抑制的情况;
3、S3在浓度2.5%以上时,同样有着明显促进作用;
4、S4的促进作用不显著。
综上所述:与原胎牛血清相比,添加单一血清组分S1对提高BAC病毒的复制效果更显著。
 
 
【讨 论】
 
上述研究系从胎牛血清中分离不同组分并观察其对病毒复制的影响,初步证实分离出的组分S1对昆虫杆状病毒复制有明显的促进作用。至于该组分是否对其它病毒复制有同等的促进作用,蕊特生物后续会进一步去验证。上述研究成果《胎牛血清不同组分对昆虫杆状病毒复制的影响》一文已刊发于《中国兽药杂志》2019年第2期(2019,53(2):11-16 )。点击“查阅原文”。